硫磷酯的测定方法

1. 技术指标

1. 主含量测定方法（液相外标法）：

流动相： 甲醇+水=60+40
波 长： 210nm
色谱柱： 250×4.6mm
流? 速:1.0ml/min
标样处理:
称取0.1g(准确至0.0002g)标样于25ml容量瓶中,用纯甲醇溶解并定容至刻度，然后移取1ml至另一25ml容量瓶中，用流动相定容至刻度。
样品处理:
称取0.1g(准确至0.0002g)样品于25ml容量瓶中,用纯甲醇溶解并定容至刻度，然后移取1ml至另一25ml容量瓶中，用流动相定容至刻度。

1. 残甲酯测定（气相归一法）方法

本方法采用气相色谱面积归一法，使用SE-54毛细管柱和FID检测器，对硫磷酯杂质进行色谱分离和测定。

1. 仪器和试剂

气相色谱仪： SP-6890 FID检测器
色谱柱： SE-54毛细管柱 30m×0.32mm×0.25um
容量瓶： 10ml
微量注射器： 10ul
三氯甲烷：色谱纯
2. 色谱操作条件
气化室：220℃ 检测室：250℃
柱 室：60℃（5min）升速 15℃∕min 终温 200℃ 保持7min
进样量：1ul
载气：N2: 0.07 MPa H2:0.05 MPa Air :0.05 MPa
尾吹：0.025 MPa吹扫：3ml/min 分流比：50:1
保留时间：
氯乙酸甲酯（残甲酯）：3.15min
巯基乙酸甲酯： 4.48min
三 甲 酯：11.30min
硫代二乙酸二甲酯： 12.40min
脱甲基硫磷酯： 14.70min
硫 磷 酯： 15.10min
异硫磷酯： 16.25min

1. 分析步骤

样品处理：称取试样0.5-0.7g左右，于10ml容量瓶中，用色谱纯三氯甲烷定容，摇匀。
注： 谱图溶剂峰2.8min以前全部删除，按平均值面积归一法报出结果。

以下是硫磷酯杂质谱图

四．三甲酯测定方法（液相外标法）:

1. 4.3.1方法提要

试样用甲醇溶解,以甲醇+水为流动相体系,使用C18键合固定相为填充物的不锈钢柱和紫外检测器,对试样中三甲酯有效成分进行高效液相色谱分离、测定,外标法定量。

1. 4.3.2试剂和溶液

甲醇：色谱纯,通过0.5μm孔径油相膜过滤
水：二次蒸馏水,通过0.5μm孔径水相膜过滤
三甲酯标准品：已知含量 ≥99.0%

1. 4.3.3仪器
2. 高效液相色谱仪：具可变波长紫外检测器和化学工作站
   色谱柱：250mm×4.6mm（id）不锈钢柱,内装C18键合固定相5μm
   超声波清洗仪
   低压溶剂玻璃过滤装置
   进样器：50μL
   容量瓶：100ml,25mL,
   移液管： 1mL,

1. 4.3.4 高效液相色谱条件

流动相：甲醇＋水=60＋40（V/V）
流量：1mL/min
柱温：35℃
检测波长：210nm
进样体积：20μL（定量环定量）
上述操作参数系典型操作参数,可根据仪器特点对给定参数作适当调整,以期获得最佳分离效果。

1. 4.3.5 测定步骤
2. 4.3.5.1标准溶液的配制：

称取三甲酯标准品0.05g（准确至0.0002g）入100mL容量瓶中,以甲醇溶解并稀释至刻度、摇匀；以1mL移液管吸此溶液1mL入一25mL容量瓶中,以流动相稀释至刻度,摇匀,以孔径为0.45μm油性过滤器过滤于一洁净密封容器中,作为待测标样溶液。

1. 4.3.5.2 试样溶液的配制

称取三甲酯原药约0.2g入25mL容量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。以孔径0.45μm油性过滤器过滤于一洁净密封容器中,作为待测试样溶液。

1. 4.3.5.3测定：

在上述操作条件下,待仪器基线稳定后,连续注入数针标样溶液,直至相邻两针峰面积相对变化之差小于1%,再按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行液谱测定。

1. 4.3.6计算：

将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中三甲酯的峰面积进行平均,三甲酯的质量分数按下式（1）计算：
X=0.01**100%………………………………(1)
式（1）中：r2—试样中三甲酯的峰面积平均值，
m1—标样中三甲酯的质量，g
P—三甲酯标样的质量分数，%
r1—标样中三甲酯的峰面积平均值
m2—试样的质量，g
0.01—试样溶液与标样浓度换算系数。

1. 4.3.7允许差

两次平行测定结果之相对差不大于1.0%时,取其平均值作为报出结果。

五．脱甲基硫磷酯测定方法（液相归一）：
分析方法：甲醇：水=50:50(0.1%磷酸)，波长=210nm，色谱柱：150mm，C18迪马色谱柱。

六．酸度和水分测定方法：
4.2酸度的测定
4.2.1 试剂和溶液
乙醇溶液：φ(C2H5OH：H2O)=50：50；
混合指示剂：φ(1g/L溴甲酚绿乙醇溶液：2g/L甲基红溶液)=3：1；
NaOH标准滴定溶液：c(NaOH)=0.02mol/L。
4.2.2 测定步骤
称取3～4g试样（精确至0.0002g）置于250mL三角瓶中，加入50mL乙醇溶液，振摇使试样溶解，加入三滴溴甲酚绿乙醇与甲基红混合指示剂，用0.02mol/L氢氧化钠标准滴定溶液滴定至亮绿色为终点。同时作空白测定。
4.2.3计算
以质量分数表示的试样的酸度X2(%),按下式计算：

c(V1-V0)×0.049
X2 =———————— ×100
m
式中：c —— 氢氧化钠标准滴定溶液实际浓度，mol/L；
V1 —— 滴定试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，mL；
V0 —— 滴定空白消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，mL；
m —— 试样质量，g；
0.049 —— 与1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)=1.000mol/L]相当的以克表示的硫酸的质量。
4.3水分的测定
按GB/T1600中的“卡尔●费休”法进行。允许使用精度相当的微量水分测定仪测定。